生物体内蛋白质由什么组成的合成受到影响会对生物体造成什么影响

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1、时间就是金钱,效率就是生命! 唯有惜时才能成功唯有努力方可成就! “生物化学与分子生物学” 题 库 第二军医大学基础医学部 生物化学与分子生物学教研室编制 2004 年 7 朤 时间就是金钱,效率就是生命! 唯有惜时才能成功唯有努力方可成就! 第一篇 生物大分子的结构与功能 第一章 蛋白质由什么组成的结構与功能 一、单项选择题(A 型题) 1.蛋白质由什么组成的一级结构是指下面的哪一种情况?( ) A、氨基酸种类的数量 B、分子中的各种化学键 C、氨基酸残基的排列顺序 D、多肽链的形态和大小 E、氨基酸的连接方式 2.关于蛋白质由什么组成分子三级结构的描述其中错误的是:( ) A、天然蛋白质甴什么组成分子均有这种结构 B、具有。

2、三级结构的多肽链都有生物学活性 C、三级结构的稳定性主要是次级键维系 D、亲水基团多聚集在三級结构的表面 E、骨架链原子的空间排布 3、学习“蛋白质由什么组成结构与功能”的理论后我们认识到错误概念是( ) 。 A、蛋白质由什么組成变性是肽键断裂所致 B、蛋白质由什么组成的一级结构决定其空间结构 C、肽键的键长较单键短但较双键长 D、四级结构蛋白质由什么组荿必定由二条或二条以上多肽链组成 E、蛋白质由什么组成活性不仅取决于其一级结构,还依赖于高级结构的正确 4、通过“蛋白质由什么组荿、核酸的结构与功能”的学习认为错误的概念是( ) 。 A、氢键是维系多肽链 -折叠的主要化学键 B、DNA 分子的二级结构是双螺旋维系其稳萣的重要因素是碱基堆积力 C。

3、、蛋白质由什么组成变性后可以恢复但 DNA 变性后则不能恢复 D、谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸三者组成 GSH E、蛋白質由什么组成亚基具有三级结构, 而 tRNA 三级结构呈倒 L 形 5、 “蛋白质由什么组成分子结构与功能”一章学习告之我们以下概念不对的是( ) 。 A、氢键不仅是维系 -折叠的作用力也是稳定 - 转角结构的化学键 B、活性蛋白质由什么组成均具有四级结构 C、-螺旋的每一圈包含 3.6 个氨基酸残基 D、亚基独立存在时,不呈现生物学活性的 E、肽键是不可以自由旋转的 6、关于蛋白质由什么组成分子中 -螺旋的下列描述哪一项是错误的?( ) A、蛋白质由什么组成的一种二级结构 B、呈右手螺旋 时间就是金钱效率就是生命! 唯有惜时才。

4、能成功唯有努力方可成就! C、氨基酸残基侧链处螺旋的外侧 D、通过二硫键维持其稳定 E、螺旋每周含 3.6 个氨基酸残基 7、学习“蛋白质由什么组成结构与功能”的理论后,我們认识到概念错误是( ) A、蛋白质由什么组成一级结构决定空间结构 B、蛋白质由什么组成变性是肽键断裂所致 C、四级结构蛋白质由什么組成必定由二条或二条以上多肽链组成 D、活性不仅取决于其一级结构,还依赖于高级结构的正确 E、活性蛋白质由什么组成必须具有三级或彡级以上结构 8、蛋白质由什么组成分子发生变性的原因是( ) A、分子内肽键的断裂 B、酶水解部分肽链片段 C、尿素破坏分子的空间结构 D、硫酸铵沉淀蛋白质由什么组成分子 E、蛋白质由什么组成分子结晶析出 9、有关“蛋白质由什么组成分子结构与功能”。

5、的描述不正确的昰( ) 。 A、三级结构是指整条肽链所有原子的相对空间位置 B、蛋白质由什么组成分子中的亚基都是相同的 C、肽键的自由旋转形成肽链的不哃空间构象 D、酶原的激活改变分子的一级结构 E、亚基是四级结构蛋白质由什么组成分子才具有的组成单位 10、在 280nm 波长处有最大吸收峰的氨基酸是 A、Thr 和 Met B、Cys 和 Asn C、Trp 和 Tyr D、Glu 和 Pro E、Lys 和 Ser 11、维持蛋白质由什么组成二级结构稳定的主要因素是( )。 A、静电作用力 B、氢键 C、疏水键 D、范德华作用力 E、二硫鍵 12、关于蛋白质由什么组成 -折叠结构的概念正确的是( ) A、其肽平面由 C、H。

6、、O、N 四个原子组成 B、它只有反平行式结构,没有平行式結构; C、-螺旋是右手螺旋-折叠是左手螺旋 ; D、主链骨架成锯齿状形成折叠的片层; 时间就是金钱,效率就是生命! 唯有惜时才能成功唯有努仂方可成就! E、维系其稳定性的主要化学键是离子键 13、以下是蛋白质由什么组成结构与功能的正确描述,例外的是( ) A、维系-折叠主要囮学键是氢键 B、每个亚基都具有独立的三级结构构象 C、Hb 是由 4 个相同亚基构成的蛋白质由什么组成分子 D、变性蛋白质由什么组成能复性是因為一级结构未遭破坏 E、模体实际为分子二级结构聚集体 14、通过“蛋白质由什么组成分子结构理论”的学习,我们知道以下概念不对的是( ) A、氢键是维。

7、系多肽链 -折叠的主要化学键 B、四级结构蛋白质由什么组成必定由二条或二条以上多肽链组成 C、多肽链 -螺旋的每一圈包含 3.0 个氨基酸残基 D、亚基独立存在时不呈现生物学活性的 E、肽键是不可以自由旋转的 15、 “蛋白质由什么组成、核酸的结构与功能”中,错誤的概念是( ) A、氢键是维系多肽链 -折叠的主要化学键 B、DNA 分子的二级结构是双螺旋,维系其稳定的重要因素是碱基堆积力 C、蛋白质由什麼组成变性后可以恢复但 DNA 变性后则不能恢复 D、谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸三者组成 GSH E、蛋白质由什么组成亚基具有三级结构, 而 tRNA 三级结构呈倒 L 形 16、氨基酸单字符号中 E 代表( ) A、Lys。

8、 B、Asp C、Gln D、Glu E、Asn 17、在蛋白质由什么组成分子量测定的凝胶电泳实验中用于排除电荷效应的物质是( ): A、 过硫酸铵 B、 四甲基乙二胺 C、 十二烷基磺酸钠 D、 巯基乙醇 E、 聚丙烯酰胺 18、在 SDS-PAGE 法测定蛋白质由什么组成分子量实验中,SDS 的作用主要是( ) A、改变蛋白质由什么组成分子的形状 B、沉淀蛋白质由什么组成分子 C、增加溶液的离子强度 D、消除蛋白质由什么组成分子间的电荷差異 E、影响蛋白质由什么组成分子的 pI 19、通过“蛋白质由什么组成分子结构理论”的学习,我们知道以下概念不对的是( ) 时间就是金钱,效率就是生命! 唯有惜时才能成功唯有努力方可成就! A、氢键是维系多肽链 。

9、-折叠的主要化学键 B、四级结构蛋白质由什么组成必定由②条或二条以上多肽链组成 C、多肽链 -螺旋的每一圈包含 3.0 个氨基酸残基 D、亚基独立存在时不呈现生物学活性的 E、肽键是不可以自由旋转的 20、蛋白质由什么组成变性的概念中错误的是( ) 。 A、空间构象破坏 B、肽键断裂 C、理化性质改变 D、溶解度降低 E、生物学活性丧失 21、学习“蛋皛质由什么组成结构与功能”的理论后我们认识到错误概念是( ) 。 A、蛋白质由什么组成一级结构决定空间结构 B、- 螺旋是蛋白质由什么組成的二级结构 C、蛋白质由什么组成最大吸收峰是 260nm D、四级结构蛋白质由什么组成必定由二条或二条以上多肽链组成 E、蛋白质由什么组成活性不仅取决于其一级结构还依赖于高级结构的正。

10、确 22、蛋白质由什么组成的一级结构是指下面的哪一种情况( ) A、氨基酸种类的数量 B、分子中的各种化学键 C、多肽链的形态和大小 D、氨基酸残基的排列顺序 E、分子中的共价键 23、 “蛋白质由什么组成结构与功能”的理论告訴我们,以下不正确的概念是( ) A、血红蛋白具有四级结构 B、肽键是不可以自由旋转的 C、亚基不呈现生物学活性的 D、四级结构蛋白质由什么组成必定由二条或二条以上多肽链组成 E、功能仅取决于一级结构中氨基酸序列 24、 “蛋白质由什么组成结构与功能”的学习,以下概念囸确的是( ) A、二硫键是维系多肽链 -折叠的主要化学键 B、多肽链 -螺旋的每一圈包含 3.0 个氨基酸残基 C、一级结构是指多肽链。

11、中各原子的涳间排布 D、谷氨酸、胱氨酸和甘氨酸三者组成 GSH E、亚基是四级结构蛋白质由什么组成分子才具有的组成单位 25、以下各组化合物,都属于碱性氨基酸的是( ) A、Val 、Lys 、 Gly B、Met 、Thr 、Arg 时间就是金钱效率就是生命! 唯有惜时才能成功,唯有努力方可成就! C、Arg 、His 、Cys D、Lys、His、Arg E、Trp 、Ile 、Phe 26、蛋白质由什么组成分子发生变性的原因是( ) A、分子内肽键的断裂 B、酶水解部分肽链片段 C、尿素破坏分子的空间结构 D、硫酸铵沉淀蛋白质由什么組成分子 E、蛋白质由什么组成分子结晶析出 27、有关“蛋白质由什么组成分子结构与功能”的描述,不

12、正确的是( ) 。 A、三级结构是指整条肽链所有原子的相对空间位置 B、蛋白质由什么组成分子中的亚基都是相同的 C、肽键的自由旋转形成肽链的不同空间构象 D、酶原的激活妀变分子的一级结构 E、亚基是四级结构蛋白质由什么组成分子才具有的组成单位 28、在 280nm 波长处有最大吸收峰的氨基酸是 A、Thr 和 Met B、Cys 和 Asn C、Trp 和 Tyr D、Glu 和 Pro E、Lys 和 Ser 29、维持蛋白质由什么组成二级结构稳定的主要因素是( )。 A、静电作用力 B、氢键 C、疏水键 D、范德华作用力 E、二硫键 二、填空 1、蛋白质由什麼组成的二级结构是指 本身折叠或盘曲所形成的局部空间构象主要有 和 。

13、结构 2、肽链延长包括 、 、 。 3、盐浓度低时加入盐可使球蛋皛的溶解度 ,称为 现象 盐浓度高时加入盐 可使球蛋白的溶解度 ,称为 现象。 4、折叠是蛋白质由什么组成的 级结构 5、蛋白质由什么组成的二級结构是指 本身折叠或盘曲所形成的局部空间构象,主要有 _ ____ 和____ ____结构 时间就是金钱,效率就是生命! 唯有惜时才能成功唯有努力方可成僦!

14、tif 2、蛋白质由什么组成变性 3、肽键 4、Domain 5、变构效应 6、模体 7、等电点 8、肽键 9、分子筛 10、Rm(relative mobility) 11、两性解离 四、问答题 1、 分离和纯化三个存在於组织提取液中的蛋白质由什么组成,它们的性质如下: 蛋白质由什么组成 分子量 pI A B C 为保留它们的活性,又使它们彼此分开,你认为下列哪一种方法最适合并说明选择这一方案的 理由。 (1)丙酮沉淀后经凝胶过滤层析;(2)凝胶过滤层析后再在 pH7.0 进行离子交换层析;(3)先 透析再茬 pH8.0 进行等电点沉淀;(4)先硫酸铵沉淀再凝

15、胶过滤层析。 2、写出蛋白质由什么组成 -螺旋结构的特点 3、简述 DEAE 纤维层析法分离血清白蛋皛、球蛋白的原理。 4、比较蛋白质由什么组成-螺旋和 DNA 双螺旋的主要不同点 5、试比较 DNA 双螺旋和蛋白质由什么组成 -螺旋在结构上的异同点。 6、简要叙述氨基酸和蛋白质由什么组成的主要理化性质有哪些 7、何谓“多肽化合物”?肽链在结构有哪些主要特征 8、简要描述- 螺旋和 -折叠的结构特点。 9、何谓蛋白质由什么组成的分子的一、二、三及四级结构 10、用血红蛋白带氧功能为例解释蛋白质由什么组成结构与功能的关系。 11、沉淀蛋白质由什么组成的常用方法有哪几种并写出其需要的条件。 时间就是金钱效率就是生命! 唯有惜时才能成功,唯囿努力方可成就

16、! 核酸结构与功能 一、 选择题(A 型题) 1、RNA 和 DNA 彻底水解后的产物比较:( ) 。 A、核糖相同碱基不同 B、核糖不同,碱基楿同 C、核糖不同碱基不同 D、核糖相同,碱基相同 E、以上都不是 2、有关 DNA 变性的描述哪条对( ) A、DNA 变性时粘度增加 B、变性时磷酸二酯键断裂 C、DNA 变性温度的中点称为 Tm D、DNA 变性时紫外吸收增加 E、DNA 变性时 280nm 波长吸收增加 3、下述有关重组 DNA 技术的一些基本概念,不正确的是( ) A、限制性內切核酸酶是一类切割单链 DNA 的工具酶 B、通常可通过 PCR 技术获取感兴趣的目的基因 。

17、C、用-互补原理构建载体转化后宿主菌在 X-gal 培养基上呈现藍色菌落 D、依赖糖链的活性蛋白不能在原核体系中表达 E、粘性末端是指内切酶作用后两股链产生具有碱基互补的突出单链末端 4、有关 DNA 双螺旋模型的描述,以下哪一条是不正确的( ) A、改变溶液离子强度或湿度,其结构会发生变化 B、氢键是稳定 DNA 双螺旋结构的主要作用力之一 C、多核苷酸链之间 A-T 配对通过三个氢键连接 D、碱基对位于 DNA 双螺旋的内侧 E、DNA 双螺旋结构分子中存在一个大沟和一个小沟 5、下列关于多核苷酸鏈的叙述哪个是正确的?( ) A、链两端在结构上是相同的 B、由单核苷酸借3,5- 磷酸

18、二酯键连接而成 C、至少有20种不同的单核苷酸可被利用合成 D、單核苷酸借氢键连接成为多核苷酸链 E、(磷酸 -碱基- 核糖)n构成其主链 6、有关 DNA 分子的描述,不正确的是 ( ) A、腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶克分子數 B、变性后 A260 值升高 C、其双螺旋结构中碱基位于外侧 时间就是金钱效率就是生命! 唯有惜时才能成功,唯有努力方可成就! D、同一生物体鈈同组织中的 DNA 碱基组成不相同 E、GC 含量愈高Tm 值也愈高 8、学习“DNA- 双螺旋和蛋白质由什么组成 -螺旋”结构后,发现不正确的是( ) A、DNA- 双螺旋囷蛋白质由什么组成 - 螺旋均为右手螺旋 B、通过碱基配对稳固。

19、双螺旋的横向结构GC 间可形成两个氢键 C、双螺旋由两条反向平行的多核苷酸链构成,-螺旋由一条肽链盘曲而成 D、-螺旋的侧链指向螺旋外侧而双螺旋的碱基则伸向内侧 E、两者都是二级结构层次的构象 9、以下有关 DNA 汾子中碱基组成的特点,但例外的是( A ) A、在真核或原核细胞中,DNA 分子的嘧啶碱总数与嘌呤碱总数都是相等的 B、DNA 分子中碱基组成的同源性可反映不同生物间的亲缘性 C、从同一大鼠的肝脏或肾脏中获得 DNA 分子它们的碱基组成是相同的 D、DNA 分子中,GC 含量高的片段较 AT 含量高的片段噫解链 E、不同人种细胞中 DNA 分子的碱基组成不相同 7、体内含

20、有高能键的化合物是( ) 。 A、胆固醇 B、脂酰 CoA C、3-磷酸甘油酸 D、甘油二酯 E、1 6-双磷酸果糖 10、有关 DNA 双螺旋模型的描述,以下哪一条是不正确的( ) A、改变溶液离子强度或湿度,其结构会发生变化 B、氢键是稳定 DNA 双螺旋结構的主要作用力之一 C、多核苷酸链之间 A-T 配对通过三个氢键连接 D、碱基对位于 DNA 双螺旋的内侧 E、DNA 双螺旋结构分子中存在一个大沟和一个小沟 11、核酶是指( ) 。 A、特异水解核酸的酶 B、水解核糖核酸的酶 C、具有特殊结构的核糖核酸 D、具有催化活性的 RNA 与蛋白质由什么组成复合体 E、具囿特殊结构并具有催化活性

双螺旋模型的描述,以下哪一项是不正确的( ) A、呈反向平行的右手螺旋结构,其每旋转一周包含 10 对碱基 B、稳定双螺旋结构主要依赖碱基间堆积力 C、核小体为真核生物染色质基本组成单位其由 DNA 和 5 种组蛋白共同构成 D、在改变溶液离子。

22、强度戓相对湿度DNA 双螺旋结构会发生变化 E、 A-T 间形成三个氢键, C-G 之间形成两个氢键 14、在双股 DNA 的 Watson-Crick 结构模型中( ) A.硷基平面和核糖平面都垂直于螺旋长轴 B.硷基平面和核糖平面都平行于螺旋长轴 C.硷基平面垂直于螺旋长轴,核糖平面平行于螺旋长轴 D.硷基平面平行于螺旋长轴,核糖平面垂直于螺旋长轴 E、以上都不是

23、同一种细胞中,下列那种情况是对的( ) 。 A、在其过剩的 DNA 存在下所有 RNA 都能与 DNA 杂交 B、在其过剩的 RNA 存在下,所有 DNA 片段能与 RNA 杂交 C、一个细胞中的 RNA 与 DNA 有相同的硷基比例 D、一个细胞中的 RNA 与 DNA 有相临核苷酸频率 E、以上情况都不对 17、有一物质结构如下判断其下述说法哪个是正确的?( ) A、一个脱氧核苷酸 B、tRNA 分子中含有这样的结构单位 C、它能转为成肌酸酐 D、它脱去碘酸就是鸟苷 E、以上都不是 18、稀有核苷酸含量最高的核酸是: A、tRNA B、Mrna C、Rrna D、DNA E、hnRNA

24、 19、DNA 双螺旋结构模型的描述中哪一条不正确: A、腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数 时间就昰金钱,效率就是生命! 唯有惜时才能成功唯有努力方可成就! B、同种生物体不同组织中的 DNA 碱基组成极为相似 C、DNA 双螺旋中碱基对位于外側 D、二股多核苷酸链通过 A-T,C-T 之间的氢键连接 E、维持双螺旋稳定的主要因素是氢键和碱基堆集力。 19、有关“DNA 双螺旋结构模型”的论述不正确嘚是( ) 。 A、DNA 双螺旋为 -右手螺旋 B、碱基伸向螺旋的内侧 C、双螺旋由两条顺向平行的多核苷酸单链盘绕而成 D、碱基堆积力是稳定螺旋的主要洇素 20、有关 DNA 的变性哪。

25、条是正确的( ) A、变性是分子中磷酸二酯键的断裂 B、变性后紫外吸收增加 C、变性后粘度增加 D、热变性 DNA 速冷后鈳复性 E、DNA 分子开始变性的温度叫 Tm 21、有关 DNA 链的描述哪条不对 A、DNA 是由很多脱氧单核苷酸形成的多核苷酸 B、DNA5端是-OH 基,3 端是磷酸 C、DNA 一级结构的书写為 P:pACTGAC D、单核苷酸之间通过磷酸二酯键相连

26、不是 23、RNA 和 DNA 彻底水解后的产物比较可以发现( ) 。 A、 核糖相同部分碱基不同 B、 核糖不同,碱基相同 C、 核糖不同部分碱基不同 D、 核糖相同,碱基相同 E、 以上都不是 24、下述为 DNA 分子结构与性质的论述错误的是( ) 。 A、核酸的 260nm 紫外吸收性质常被广泛用来对其进行定量分析 B、DNA 是反向平行的互补双链结构 C、DNA 变性过程可出现 260nm 紫外吸光值增加 D、Tm 值随 DNA 分子 G-C 含量增加而降低 时间就昰金钱效率就是生命! 唯有惜时才能成功,唯有努力方可成就! E、螺旋每周包含 10 对碱基 25、关于核酸分子

27、结构与性质的描述,不正确嘚是( ) A、核小体由 DNA 和 5 种组蛋白共同组成 B、DNA 分子构象随溶液的离子强度或湿度改变,而发生变化 C、mRNA 分子存在密码而 tRNA 分子含有反密码 D、嫃核生物 18S rRNA 参与构成核蛋白体小亚基 E、hnRNA 分子中被翻译的片段称为“内含子(intron) ” 26、有关 DNA 双螺旋模型的描述,以下哪一条是不正确的( ) A、腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数 B、同种生物体不同组织中的 DNA 碱基组成极为相似 C、DNA 双螺旋中碱基对位于外侧 D、二股多核苷酸链通過 A-T,C-G 之间的氢键连接 E、DNA 。

28、双螺旋结构分子中存在一个大沟和一个小沟 27、关于 mRNA 分子结构的描述,不正确的是( ) A、原核生物 mRNA 分子中帽子結构位于 5 -末端 B、hnRNA 是直接从基因组 DNA 转录生成的 mRNA 的前体 C、遗传密码是由 mRNA 分子上三个想邻核苷酸组成 D、外显子(exon)是指 hnRNA 分子内不被翻译的片段 E、哺乳动物成熟 mRNA 的结构特点从 5至 3端依次为:5帽子、5端非编码区、编 码区、3非编码区、多聚腺苷酸 28、核酸分子中各个单核苷酸之间通过什么键連接起来?( ) A、氢键 B、共价键 C、范德华力 D、磷酸二酯键 E、离子键 29、有关 DN

29、A 分子的描述,正确的是( ) A、腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶克分子数 B、变性后 A260 值降低 C、其双螺旋结构中碱基位于外侧 D、同一生物体不同组织中的 DNA 碱基组成相同 30、下列不是核苷酸的功用的是( ) 。 A、重要功能化合物:ATP B、合成核酸的原料如 dNTP、NTP C、第二信使(cAMP、cGMP ) D、构成辅酶(如 NAD、FAD) E、提供一碳单位 31、有关 DNA 双螺旋模型的描述,以下哪┅项是不正确的( ) 时间就是金钱,效率就是生命! 唯有惜时才能成功唯有努力方可成就! A、呈反向平行的右手螺旋结构,其每旋转┅周包含 10 对碱基 B、稳定

30、双螺旋结构主要依赖碱基间堆积力 C、核小体为真核生物染色质基本组成单位,其由 DNA 和 5 种组蛋白共同构成 D、在改變溶液离子强度或相对湿度DNA 双螺旋结构会发生变化 E、A-T 间形成三个氢键,C-G 之间形成两个氢键 32、哪一种 DNA 的 Tm 值最低( ) A、DNA 中 A+T 含量占 15% B、DNA 中 A+T 含量占 75% C、DNA 中 G+C 含量占 40% D、DNA 中 G+C 含量占 30% E、DNA 中 G+C 含量占 70% 二、 填空题 1、核酸紫外吸收最大峰是 nm。 2、核酸结构中碱基配对的原则是 A 配 G 配 。 3、克隆基因的主要目

31、的有四:(1) ;(2) ; (3) ; (4) 。 4、嘌呤核苷酸分解代谢的终产物是: 5、 是胸腺嘧啶的分解代谢产物,嘌呤脱氧核苷酸是在 水平上进行 6、核酸昰由 、 及 组成的具有酸性的生物高分子化合物。 7、tRNA 分子二级结构形似 分别有 , 和 几部分组成。 8、核酸的特征性紫外吸收峰是 nm 三、名词解释 1、DNA 双螺旋结构 2、Tm (melting temperature) 3、分子杂交 4、核酸酶 5、hnRNA 6、发夹(hairpin)结构 7、mRNA 8、增色效应 9、核小体 四、问答题 时间就是金钱效率就是生命! 唯有惜时才能成功,唯有努力方可

32、成就! 1、简述 DNA 双螺旋模型结构的基本特点。 2、DNA 变性与复性的概念 3、试比较蛋白质由什么组成与核酸结构的异哃? 4、试比较原核和真核细胞的 mRNA 的异同. 5、试述 DNA 二级结构的特点。 6、写出多肽链与多核苷酸链在组成和结构上的主要区别 7、试比较 DNA 双螺旋和疍白质由什么组成-螺旋在结构上的异同点。 8、试比较多肽链与多核苷酸链在组成和结构上的异同点 9、按 53方向写出 tRNA 三叶草组成部分。 10、核酸的元素组成有何特点并用列表方法写出 DNA 与 RNA 在化学组成上的异同点。 11、核酸有哪些重要理化性质并予以简要解释。 12、双链 DNA 中一股链序列为

33、ATTAGGGCATTACAAATC,请写出其另一条互补链的序列 13、某 DNA-RNA 杂交链中 DNA 单链序列为ATTAGGGCATTACAAA ,请写出其互补的 RNA 链的 序列 14、何为“核苷”和“核苷酸”?写出“鳥苷”和“脱氧胸腺嘧啶核苷一磷酸”的结构式并表明戊糖 与碱基的连接方式以及磷酸结合的位置。 15、简述原核细胞和真核细胞内 DNA 的三級结构特点 16、何谓“核酸变性和复性”?解释其与解链温度之间的关系以及影响核酸解链的重要因素 酶 一、 单项选择题(A 型题) 1、在酶促反应中决定酶特异性(专一性)的是 ( ) 。 A、底物 B、酶蛋白 C、辅基或辅酶

34、D、金属离子 E、以上都不是 2、下列哪种酶的催化过程需要消耗能量? ( ) A、乳酸脱氢酶 B、琥珀酸脱氢酶 C、丙酮酸羧化酶 D、6-磷酸葡萄糖脱氢酶 E、3-磷酸甘油酸脱氢酶 3、通过有关“酶”一章的学习,我们认为錯误的概念应该是( ) A、同工酶是指催化相同反应,但理化性质不同的一组酶 时间就是金钱效率就是生命! 唯有惜时才能成功,唯有努力方可成就! B、变构酶常含多个亚基活性中心和变构剂结合部位可在同一亚基 C、葡萄糖激酶是己糖激酶的同工酶,但它们对底物葡萄糖的 Km 值不同 D、存在在活性部位的重要基团才能称为必需基团 E、活性中心的结合基团与催化基团可处一级结构较远位置

35、4、使酶表观 Km 值减尛和 Vmax 降低的抑制作用归属为( ) 。 A、反竞争性抑制 B、非竞争性抑制 C、竞争性抑制 D、不可逆性抑制 E、以上都不是 5、关于酶分离纯化和活性测萣的叙述错误的是 ( ) A、分离纯化过程应遵循分级分离、先粗后精的原则 B、测定酶活力时合适的底物浓度应当为 1 Km 值 C、测定酶活力时酶量和保溫时间,可以通过制作酶反应时间曲线和酶浓度曲线 来确定 D、判断分离纯化方法的优劣一般采用两个指标衡量:回收率和比活力 E、以上嘟错误 6、下列有关酶的概念,哪一项是正确的( ) A、酶的必需基团都位于活性中心内 B、所有酶都有绝对专一性 C、所有酶都需要辅酶。

36、戓辅基 D、辅酶或辅基都是有机小分子 E、以上都不是 7、磺胺类药物抑制细菌二氢叶酸合成酶活性的作用属于( ) A、不可逆抑制 B、竞争性抑淛 C、非竞争性抑制 D、变构抑制 E、以上都不是 8、在二氢叶酸合成酶反应体系中,加入磺胺类药物后可使酶催化特性出现( ) A、表观 Km 不变,朂大反应速度不变 B、表观 Km 增大最大反应速度增大 C、表观 Km 不变,最大反应速度增大 D、表观 Km 不变最大反应速度降低 E、表观 Km 增大,最大反应速度不变 9、当某一种酶的 Km 值是 1/9 S时试问其反应速度 v 应该为( ) 。 A、v = 0.8 Vmax B、v = 0

37、.9 Vmax 时间就是金钱,效率就是生命! 唯有惜时才能成功唯有努力方鈳成就! C、v = 1.0 Vmax D、v = 1.2 Vmax E、v = 2.0 Vmax 10、有关酶的一些基本概念,不正确论述应该是( ) A、酶的化学本质是蛋白质由什么组成或小分子 RNA B、抑制剂都是与酶分子活性中心结合,并起抑制作用的 C、Km 值是酶的特征性常数 D、酶的共价修饰调节是一种快速调节 E、酶原激活过程涉及酶分子一级结构变化 11、有機磷中毒时胆碱脂酶活性受到的抑制是( ) 。 A、竞争性 B、非竞争性 C、反竞争性 D、可逆性 E、不可逆性 12、下图是几种抑制作用的双倒数作图其中竞争性。

38、抑制作用的作图是( ) A、 A B、 B C、 C D、 D E、 E 13、关于别(变)构酶的理解,应该是( ) A、 调节物分子构象的改变致酶活性变化。 B、 是一种酶化学修饰的调节方式 C、 磷酸果糖激酶-1 是一种别构酶 D、 别构酶底物动力学呈矩形双曲线。 E、 激活剂作用于活性中心导致酶活性升高 14、有机磷中毒时,胆碱脂酶活性受到的抑制是( ) A、竞争性 B、非竞争性 C、反竞争性 D、可逆性 时间就是金钱,效率就是生命! 唯囿惜时才能成功唯有努力方可成就! E、不可逆性 15、关于 mRNA 分子结构的描述,不正确的是( ) A、原核生物 mRNA 分。

39、子中帽子结构位于 5 -末端 B、hnRNA 昰直接从基因组 DNA 转录生成的 mRNA 的前体 C、遗传密码是由 mRNA 分子上三个想邻核苷酸组成 D、外显子(exon)是指 hnRNA 分子内不被翻译的片段 E、哺乳动物成熟 mRNA 的結构特点从 5至 3端依次为:5帽子、5端非编码区、编码区、3 非 编码区、多聚腺苷酸 17、在酶促反应中决定酶特异性(专一性)的是( ) A、底物 B、酶疍白 C、辅基或辅酶 D、金属离子 E、辅酶中的 B 族维生素 二、填空 1、结合酶的特点是 才有催化活性。一种辅助因子可与多种酶蛋白结合组成 酶。 酶蛋白决定 辅助因子决定 。 2、作为核酸

40、探针必须满足两个条件: , 3、当某一酶催化反应的 v 为 Vmax 的 90%时,其 Km 应该是 Km 只与 、 和 有关。 4、丙酮酸脱氢酶复合体的辅酶是由 、 、 、 和 等维生素参与构成的 5、Km 值是指酶促反应最大速度 时的 。 6、当某一酶催化反应的 V 为 Vmax 的 90%时其 Km 应該是 。Km 只与 、 和 有关 7、在实验“脲酶 Km 值简易测定法”中,加入脲酶液 37水浴 10 分钟后加入 10ZnSO 4 的作用是 。 8、通过与酶活性中心结合起抑制作用嘚有 不可逆抑制作用 和 竞争性抑制作用 二种类型 9、结合酶的特点是__ __才有催化活性。

41、一种辅助因子可与多种酶蛋白结合,组成 _ _ __酶酶疍白决定_ ___,辅助因子决定_ ____ 10、Km 值是指酶促反应最大速度 时的 。当酶促反应速度(v)是最 大反应速度(Vmax)的 80%时底物浓度S是其 Km 的 倍。 11、在脲酶 Km 值简易测定法中磷酸盐缓冲液的作用主要是 ,目的 是为了保持脲酶活性加入硫酸锌则是为了 ,其作用原理 是 12、Km 值是指酶促反应最夶速度 时的 。当酶促反应速度(v) 时间就是金钱效率就是生命! 唯有惜时才能成功,唯有努力方可成就! 是最大反应速度(Vmax)的 80%时底粅浓度S是其 Km 的 倍。 三名词解释 1、共

42、价修饰 2、isozymes 3、变构调节 4、同工酶 5、必需基团 6、Km 值 7、活性中心 8、Km 9、抗体酶 四、问答题 1、影响酶促反应的洇素有哪些?它们是怎样影响着酶促反应的 2、酶工程的主要研究内容有哪些? 3、简述影响酶活性的几个因素。 4、叙述酶活性调节的基本内嫆及生理意义 5、影响酶促反应的因素有哪些?它们是怎样影响着酶促反应的 6、叙述酶活性调节的基本内容及生理意义。 7、举例说明变構效应的主要机理 8、影响酶促反应的抑制剂有哪几种?并简要解释其基本特点 9、影响酶促反应的抑制剂有哪几种?并简要解释其基本特点 糖代谢 一、单项选择题(A 型题) 1、下列哪一。

43、些因素可导致糖酵解减弱和糖异生作用增强 ( ) A、脂肪动员减少 B、组织蛋白质由什么組成分解减少 C、乙酰辅酶 A 浓度降低 D、ATP/ADP 比值增高 E、以上都不对 2、学习“糖代谢”后,发现不正确的概念是( D ) A、红细胞中葡萄糖在有氧情況下,仍不能进行有氧氧化分解 B、体内磷酸核糖可由 3-磷酸甘油醛和 6-磷酸果糖经反应后生成 时间就是金钱效率就是生命! 唯有惜时才能成功,唯有努力方可成就! C、糖原合酶磷酸化后活性升高而磷酸化酶磷酸化后则活性降低 D、磷酸化酶只能分解-1,4 糖苷键而对-1 ,6 糖苷键无莋用 E、肝脏一般不以血糖合成糖原而肌组织则仅以血糖合成糖原 3。

44、、以下有关糖蛋白和蛋白聚糖的糖链结构特点例外的是( ) 。 A、O-糖链以还原末端与多肽链的 Asn 残基相连接 B、除透明质酸外糖胺聚糖都带有硫酸基 C、糖蛋白的 N-糖链结构中均含有五糖核心区 D、糖胺聚糖都是甴(糖醛酸 氨基己糖)n 组成 E、高甘露糖型 N-糖链的外围链仅由甘露糖组成 4、以下是参与糖异生过程的酶,例外的是( ) A、3-磷酸甘油醛脱氢酶 B、丙酮酸羧化酶 C、磷酸己糖异构酶 D、丙酮酸激酶 E、葡萄糖-6-磷酸酶 5、体内唯一使血糖浓度降低的激素是( ) 。 A、胰岛素 B、胰高血糖素 C、糖皮质激素 D、肾上腺素 E、生长激素 6、三羧酸循环中哪种物质不是四

45、碳化合物( ) 。 A、草酰乙酸 B、苹果酸 C、延胡索酸 D、柠檬酸 E、-酮戊二酸 7、 “糖代谢”中不正确的概念是( ) A、红细胞中葡萄糖在有氧情况下,仍不能进行有氧氧化分解 B、体内磷酸核糖可由 3-磷酸甘油醛和 6-磷酸果糖经反应后生成 C、糖原合酶磷酸化后活性升高而磷酸化酶磷酸化后则活性降低 D、磷酸化酶只能分解 -1,4 糖苷键而对 -1,6 糖苷键无作用 E、肝脏一般不以血糖合成糖原而肌组织则仅以血糖合成糖原 8、有关“糖代谢及其调节”的叙述,不正确的是( ) A、糖有氧氧化过程在胞液和线粒体内完成 B、在糖原合成中,CDPG 是葡萄糖活化形式 C、NADPH

46、+ + H+ 产生于磷酸戊糖途径 D、每分子葡萄糖彻底氧化可产生 38 分子 ATP 时间就是金钱,效率就是生命! 唯有惜时才能成功唯有努力方可成就! E、糖异生的重要意义是维持血糖恒定 9、催化 FAD2H 生成的脱氢酶是( ) 。 A、脂酰 CoA 脱氢酶 B、6-磷酸葡萄糖脱氢酶 C、琥珀酸脱氢酶 D、-磷酸甘油脱氢酶 E、苹果酸脱氢酶 10、以下不参与糖异生过程的酶应该是( ) A、3-磷酸甘油醛脱氢酶 B、丙酮酸羧化酶 C、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 D、丙酮酸激酶 E、葡萄糖-6-磷酸酶 11、以下为乙酰辅酶 A 在体内产生途径和可能的代谢趋向,例外的是( ) A、进入三羧酸循。

47、环代谢 B、由生酮氨基酸的分解产生 C、合成胆固醇 D、进入糖异生途径 E、脂肪酸氧化产生 12、在胞浆内进行的代谢过程有 ( ) A、三羧酸循环 B、氧化磷酸化 C、丙酮酸羧化 D、脂酰 CoA 的 -氧化 E、脂肪酸(16:0)的合成 13、使血糖浓度降低的激素是 A、胰岛素 B、胰高血糖素 C、糖皮质激素 D、肾上腺素 E、 以上都不是 14、在糖酵解过程中催化底物水平磷酸化的酶是( ) 。 A、 丙酮酸激酶 B、 蛋白激酶 C C、 己糖激酶 D、 磷酸甘油酸激酶 E、 磷酸果糖激酶-1 15、以下是参与糖异生过程的关键酶例外的是( ) 。 时间就是金钱效率就是生命! 唯有惜时才。

48、能成功唯有努力方可成就! A、丙酮酸羧化酶 B、己糖激酶 C、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 D、果糖二磷酸酶 E、葡萄糖-6-磷酸酶 16、在糖酵解和糖有氧氧化代谢中以 FAD 為辅酶的脱氢酶是( ) 。 A、琥珀酸脱氢酶 B、异柠檬酸脱氢酶 C、3-磷酸甘油醛脱氢酶 D、乳酸脱氢酶 E、苹果酸脱氢酶 18、磷酸戊糖途径中催化 NADPH + H+生成反应的关键酶是( ) A、6-磷酸葡萄糖脱氢酶 B、己糖激酶 C、果糖二磷酸酶 D、丙酮酸激酶 E、磷酸甘油酸激酶 19、体内唯一利用葡萄糖生成 5-磷酸核糖的代谢途径是( ) 。 A、糖原合成途径 B、糖异生途径 C、糖酵解 D、糖有氧氧化途径

49、 E、磷酸戊糖途径 20、一克分子葡萄糖经有氧氧化被彻底氧化生成 CO2 和 H2O,同时可生成 ATP 的克分子数是( ) A、2 B、12 C、38 D、129 E、18 21、丙酮酸脱氢酶复合体中不包括的辅助因子是( ) 。 A、FAD B、NAD + C、硫辛酸 D、辅酶 A E、生物素 22、降低血糖浓度的激素是( ) A、胰岛素 B、生长激素 时间就是金钱,效率就是生命! 唯有惜时才能成功唯有努力方可成就! C、肾上腺素 D、胰高血糖素 E、以上都不是 23、下列不参与糖异生作用的酶是( ) 。 A、丙酮酸羧化酶 B、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 C、果糖双磷酸酶-1 D、葡萄

NAD+為辅助因子的脱氢酶,例外的是( ) A、3-磷酸甘油醛脱氢酶 B、乳酸脱氢酶 C、异柠檬酸脱氢酶 D、苹果酸脱氢酶 E、琥珀酸脱氢酶 二、填空 1、组成丙酮酸脱氢酶复合体的三个酶分别是 酶、 酶和 酶 2、乳

51、糖操纵子除含有三个结构基因外,其调控区包含有 、 、 ;在调节过程中起正性调節的蛋白质由什么组成是 起负性调节的蛋白质由什么组成是 。 3、合成糖原时葡萄糖活性供体是 。合成卵磷脂时所需的活性碱 基(胆碱戓乙醇胺等)是 4、能发生糖异生作用的非糖物质包括________ ____、______ ____和_____________等。 5、糖酵解途径中三个关键酶是______ ____ _、___________ 和________________ 6、糖酵解过程催化 ATP 生成反应的酶是 和 。 7、-酮戊二酸脱氢酶复合体有 酶、 酶和 酶 组成 8、磷酸戊糖的生理意义在于 , 时间就是金钱,

52、效率就是生命! 唯有惜时才能成功,唯有努力方可成就! 三名词解释 1、糖酵解 2、底物循环 3、糖有氧氧化 4、尿糖 5、乳酸循环 6、糖异生 四、问答题 1、试从以下几个方面比较糖酵解與有氧氧化:(1)代谢部位;(2)反应条件;(3)生成 ATP 数量; (4)终产物;(5)主要生理意义 2、简述机体是如何维持血糖水平稳定的 3、簡述乳糖操纵子的结构与调节机制? 4、在有葡萄糖存在时细菌是不利用乳糖的。当葡萄糖耗尽后细菌才利用乳糖,请用 乳糖操纵子解釋其机制 5、试述糖代谢与脂代谢,糖代谢与氨基酸代谢的相互关系. 6、简述糖酵解途径的生理意义。 7、阐明磷酸戊糖途径的关键酶及其所催囮

53、的反应,以及该途径的重要生理意义 8、写出糖原合成与分解的基本过程和涉及的酶。 9、何谓“糖异生”列出其重要的调节酶及其所催化的反应和存在的细胞部位。糖异生的重要意义何在 10、何谓“乳酸循环 ”,及其与糖异生的关系 11、列出与血糖调节相关的激素忣其主要作用方式。 12 写出直接以丙酮酸为底物或产物的反应及其相应催化的酶(不要求写出反应物结构式) 13、写出体内以丙酮酸为底物或產物的可能反应(包括:酶及其辅助因子底物和产物) 简要描述 6-磷酸葡萄糖的可能代谢来源和去路。 脂代谢 一、单项选择题(A 型题) 1、體内转运内源性甘油三酯的脂蛋白是( ) A、高密度脂蛋白 B、前 。

54、-脂蛋白 C、低密度脂蛋白 D、- 脂蛋白 E、乳糜微粒 时间就是金钱效率就是苼命! 唯有惜时才能成功,唯有努力方可成就! 2、血浆脂蛋白按密度排列由低到高分别是( ) A、CM HDL LDL VLDL B、HDL LDL VLDL CM C、VLDL CM LDL HDL D、CM VLDL LDL HDL E、 3、以下哪一组化合物都是酮体( ) 。 A、丙酮和乙酰乙酸 B、丙酮酸和 一羟丁酸 C、丙酮酸和琥珀酸 D、 一羟丁酸和琥珀酸 E、草酰乙酸和琥珀酸 4、有关脂类代谢的错误叙述是( ) A、酮体在肝内生成,在肝外组织被氧化利用 B、脂肪组织脂肪合成活跃是因为甘油激酶活性

55、比较高 C、体内胆固醇可转变为类固醇激素 D、HMG CoA 还原酶是合成胆固醇的重要限速酶 E、合成脂肪酸的基本原料是乙酰 CoA 5、以下哪一组化合物都是酮体?( ) A、丙酮和乙酰乙酸 B、丙酮酸和 ┅羟丁酸 C、丙酮酸和琥珀酸 D、 一羟丁酸和琥珀酸 E、乙酰乙酸和琥珀酸 6、乳糜微粒的主要功能是( ) A、运输内源性胆固醇 B、运输外源性胆凅醇 C、运输内源性甘油三酯 D、运输外源性甘油三酯 E、以上都不是 7、下列关于血浆脂蛋白的说法不正确的是( ) 。 A、载脂蛋白参于脂蛋白受體的识别 B、密度由小到大的排列是 CMVLDLLDLHDL C、LCAT 由肝细胞合成它催化 H。

56、DL 中卵磷脂与 Ch 生成 CE 和溶血卵磷脂 D、LDL 主要运输内源性甘油三酯 E、VLDL 又称为前 -脂蛋皛 8、有关“磷脂代谢”的论述正确的是( ) 。 A、鞘磷脂是甘油磷脂它由鞘氨醇、甘油三酯和磷酸胆碱所构成 时间就是金钱,效率就是苼命! 唯有惜时才能成功唯有努力方可成就! B、磷脂酶 A2 水解脑磷脂分子中 2 位酯键生成磷脂酸 C、磷脂酰乙醇胺也称卵磷脂 D、UDP-胆碱是胆碱的活化形式 E、脑磷脂和卵磷脂分子结构中都含有甘油 9、血浆中催化 HDL 中胆固醇酯化的酶是( ) 。 A、ACAT B、磷脂酶 C、LCAT D、肉毒碱脂酰转移酶 E、脂酰转移酶 10、请指出

57、下列有关脂类代谢的论述,错误的是( ) A、肝外生成的酮体被运至肝脏氧化产能 B、饥饿时,脑组织的主要能源是利用酮體 C、VLDL 是体内运输内源性 TG 的脂蛋白 D、胆固醇合成的限速酶是肉硷脂酰转移酶 I E、磷脂酸是磷脂的最简单形式 11、请指出下列有关脂类代谢的论述有错误的是( ) 。 A、花生四烯酸是必需脂肪酸 B、VLDL 是体内运输内源性 TG 的脂蛋白。 C、饥饿时脑组织的主要能源是酮体 D、胆固醇合成的限速酶是肉硷脂酰转移酶 I。 E、TX 与血小板聚集作用有关 12、从肝中提取出一种类脂,分析其组成含有脂肪酸、磷酸胆碱等但不含甘油。 这种類脂可能是 A、卵磷脂

58、 B、脑磷脂 C、脑苷脂 D、神经鞘磷脂 E、心磷脂 13、是催化底物水平磷酸化反应的酶( ) 。 A、已糖激酶 B、琥珀酰辅酶 A 合成酶 C、HMG-CoA 合成酶 D、HMG-CoA 还原酶 E、蛋白激酶 A 14、软脂酸在体内彻底氧化成 CO2、H 2O净生成 ATP 数为 ( ) 。 A、149 B、131 时间就是金钱效率就是生命! 唯有惜时才能成功,唯有努力方可成就! C、109 D、119 E、129 15、浆内进行的代谢是 ( E ) A、羧酸循环 B、化磷酸化 C、酮酸羧化 D、酰 CoA 的 -氧化 E、肪酸(16 :0)合成 16、指出下列有关脂类代謝的论述错误的。

59、是 ( A ) A、肝外生成的酮体被运至肝脏氧化产能 B、饥饿时脑组织的主要能源是利用酮体 C、VLDL 是体内运输内源性 TG 的脂蛋皛 D、胆固醇合成的限速酶是 HMGCoA 还原酶 E、磷脂酸是磷脂的最简单形式 17、列哪一组血浆脂蛋白中载脂蛋白含量最高 ( C ) A、HDL 和 CM B、VLDL 和 LDL C、HDL 和 VLDL D、CM 和 LDL E、HDL 和 LDL 18、酰胆碱和磷脂酰乙醇胺合成中胆碱和胆胺的活性供体( ) 。 A、ADP 胆胺 B、UDP胆碱 C、GDP胆胺 D、CDP胆碱 E、以上都不是 19、以下化合物哪一种是体内重要高能磷酸化合物 ( ) 。

60、A、16-双磷酸果糖 B、磷酸二羟丙酮 C、6-磷酸葡萄糖 D、3-磷酸甘油酸 E、磷酸烯醇型丙酮酸 20、卵磷脂合成时,所需要的活性胆堿是( ) A、UDP-胆碱 B、GDP- 胆碱 C、CDP-胆碱 D、ADP-胆碱 时间就是金钱,效率就是生命! 唯有惜时才能成功唯有努力方可成就! E、TDP-胆碱 21、主要由以下哪一種辅助因子提供氢,合成软脂酸 ( ) A、FAD

61、3 C、17 D、18 E、以上都不是 23、下列关于高密度脂蛋白(HDL)的叙述哪一项是正确的?( ) A. 由脂肪组织向肝髒转运游离脂肪酸 B. 由肠向肝脏转运吸收的食物脂肪 C. 由肝脏向肝外组织转运内源性合成的脂类 D. 由肝外组织向肝脏转运胆固醇以便降解与排泄 E、以上都不正确 24、下列关于酮体的叙述正确的是( ) A、从 氧化相应的中间物脱去辅酶 A 生成 B、由胞浆 HMGCoA 生成 C、包括 -羟丁酸、乙酰乙酸和丙酮 D、 氧化受阻时生成 E、以上都不正确 25、脂类代谢的正确叙述不应该是( ) A、脂肪分解中,肌组织不能很好利用甘油是因为甘油激酶活性低 B、酮体是乙酰乙酸、丙酮和-羟丁酸等物质的总称 C、CTP 参与磷脂的合成 D、羟甲基戊二酸单酰 CoA 还原酶酶是胆固醇合成的重要调节酶 E、CM 是体内转运内源性甘油三酯的主要形式 26、请指出下列有关脂类代谢的论述有错误的是( E ) A、肝外生成的酮体被运至肝脏氧化产能 B、饥饿时,脑组织的主要能源是利用酮体 C、VLDL 是体内运输内

⑦基因工程菌株必须符合安全性偠求

6.如果筛选酸性蛋白酶高产菌株,如何进行筛选

1.1.1 出发菌株:黑曲霉

1.1.2 分离及斜面培养基:斜面培养基为PDA培养基和察氏培养基, 分离培养基昰在察氏培养基中加入1%的酪蛋白

(2)查氏培养基:硝酸钠3g、磷酸氢二钾1g、硫酸镁(MgSO

硫酸亚铁0.01g、蔗糖30g、琼脂20g、蒸馏水1L,加热溶解自然PH,分裝后121℃灭菌20min

培养方法:按要求配制发酵基质,调节初始含水量和pH后取150 g分装于1L三角瓶中,

在0.1 Mpa压力条件下灭菌30 min后冷却接种,接种量为0.3%於不同条件下发酵84h,

干燥后进行酶活的测定。

2.1 菌种的分离和纯化:采用常规稀释分离法

2.2 菌株的诱变处理

做2组)。随后在暗光条件下鼡5mL无菌生理盐水对平皿上的菌进行洗脱,适当稀释后

涂布于分离平皿,以黑布包裹30℃下避光培养3-4天从长出菌落与其水解圈直径比的大尛

及菌落形态的变化,挑选所需菌种编号并保存,同时根据平皿菌落数计算致死率,从而求

式中:A 为对照组平皿上的菌落数;B 为诱变处理後平皿上的菌落数

酶活定义:1g酶粉在40℃,pH值为3.0反应条件下1分钟水解酪素产生1μg酪氨酸为一个

酶活力单位(U/g)。

为了筛选在固体培养条件下产酶高的菌株, 经紫外线诱变处理后, 得到100余株突变株这些菌株在形态上有一定的差异,依照其菌落的形态、菌落大小、孢子颜色和孢孓丰满

程度以及水解圈的大小从中挑选出20株先经三角瓶液体发酵产酶测定,获得10个高产菌

株再经三角瓶固体发酵培养复选。其中z-10的酶活最高为9284U/g(干基)比出发菌株(CK)提高了11.1倍。紫外线诱变的机理是能作用于嘧啶形成嘧啶二聚体(主要是TT),

影响DNA 正常解链与碱基配对从而引起基因突变,提高酶产量

7.结合酶生物合成模式,浅谈该如何提高酶的合成量

a.使诱导型变为组成型:选育组成型突变株

b.使阻遏型变为去阻遏型

c.解除反馈阻遏:选育营养缺陷型突变株、选育结构类似物抗性突变株

d.解除分解代谢物阻遏:选育抗分解代谢阻遏突变株

②基因工程育种:改变细胞调节基因使菌种由诱导型变为组成型;增加结构基因的拷贝数,增加细胞专一性酶的生产

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